Idagbasoke ti ọna ELISA aiṣe-taara fun wiwa ti aarun gbuuru nla ti porcine coronavirus IgG antibody da lori amuaradagba iwasoke atunkopọ

Aisan gbuuru Porcine Acute Coronavirus (SADS-CoV) jẹ tuntun ti a ṣe awari porcine enteric pathogenic coronavirus ti o le fa igbe gbuuru omi ni awọn ẹlẹdẹ ọmọ tuntun ati fa awọn adanu ọrọ-aje pataki si ile-iṣẹ ẹlẹdẹ.Ni lọwọlọwọ, ko si ọna serological ti o yẹ lati ṣe iṣiro imunadoko ti ikolu SADS-CoV ati ajesara, nitorinaa iwulo ni iyara lati lo idanwo imunosorbent ti o ni asopọ enzyme ti o munadoko (ELISA) lati ṣe atunṣe aipe yii.Nibi, plasmid recombinant ti n ṣalaye SADS-CoV spike (S) amuaradagba ti o dapọ pẹlu agbegbe IgG Fc eniyan ni a ṣe lati ṣe agbejade baculovirus atunko ati ṣafihan ni awọn sẹẹli HEK 293F.Amuaradagba S-Fc ti di mimọ pẹlu amuaradagba G resini ati pe o ni idaduro ifaseyin pẹlu egboogi-eda eniyan Fc ati egboogi-SADS-CoV awọn aporo.Lẹhinna a lo amuaradagba S-Fc lati ṣe agbekalẹ ELISA aiṣe-taara (S-iELISA) ati mu awọn ipo iṣesi ti S-iELISA dara si.Gẹgẹbi abajade, nipa ṣiṣe ayẹwo iye OD450nm ti 40 SADS-CoV sera odi ti a fọwọsi nipasẹ idanwo immunofluorescence (IFA) ati didi ti Iwọ-oorun, iye gige kuro ni ipinnu lati jẹ 0.3711.Olusọdipúpọ ti iyatọ (CV) ti 6 SADS-CoV sera rere laarin ati laarin awọn ṣiṣe ti S-iELISA gbogbo wọn kere ju 10%.Idanwo ifasilẹ-agbelebu fihan pe S-iELISA ko ni ifasilẹ-agbelebu pẹlu sera ọlọjẹ porcine miiran.Ni afikun, da lori wiwa ti awọn ayẹwo omi ara ile-iwosan 111, oṣuwọn lasan apapọ ti IFA ati S-iELISA jẹ 97.3%.Idanwo imukuro ọlọjẹ naa pẹlu awọn iye OD450nm oriṣiriṣi 7 ti omi ara fihan pe iye OD450nm ti a rii nipasẹ S-iELISA ni ibamu daadaa pẹlu idanwo didoju ọlọjẹ naa.Nikẹhin, S-iELISA ni a ṣe lori awọn ayẹwo omi ara ẹlẹdẹ 300.Awọn ohun elo ti iṣowo ti awọn enteroviruses porcine miiran fihan pe awọn oṣuwọn rere IgG ti SADS-CoV, TGEV, PDCoV ati PEDV jẹ 81.7%, 54%, ati 65.3%, ni atele., 6%, lẹsẹsẹ.Awọn abajade fihan pe S-iELISA jẹ pato, ifarabalẹ, ati atunṣe, ati pe o le ṣee lo lati ṣawari ikolu SADS-CoV ni ile-iṣẹ ẹlẹdẹ.Nkan yii ni aabo nipasẹ aṣẹ lori ara.gbogbo awọn ẹtọ wa ni ipamọ.


Akoko ifiweranṣẹ: Oṣu Keje-22-2021